以部分外泌體專利中外泌體凍干保護(hù)劑種類為例，常用的保護(hù)劑種類包括糖類、緩沖鹽和氨基酸：

① 針對(duì)糖類的選擇:大部分外泌體文獻(xiàn)研究中使用海藻糖，但也有相關(guān)專利中使用蔗糖。海藻糖的水解速率，吸濕性以及玻璃化轉(zhuǎn)變溫度均要優(yōu)于蔗糖，但是在其他領(lǐng)域比如抗體領(lǐng)域以及脂質(zhì)體藥物中，蔗糖在上市產(chǎn)品中的使用較多，且蔗糖單價(jià)較低，因此，針對(duì)糖類的選擇要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)比較，根據(jù)具體情況選擇；

② 針對(duì)緩沖鹽的選擇:需要考慮在冷凍干燥情況下的pH偏移情況。在調(diào)研到的凍干保護(hù)劑中有用到TRIS和PBS的。這個(gè)需要根據(jù)緩沖體系對(duì)穩(wěn)定性的影響來判定，例如緩沖體系是PBS，當(dāng)pH變化顯著影響制劑中活性成分穩(wěn)定性，建議棄用PBS，換用其他生物緩沖體系（如組氨酸，Tris，HEPES等）；若影響在可接受范圍內(nèi)，出于生產(chǎn)或?qū)徟蚱渌蛩貎A向于選擇PBS，建議制劑處方中選用海藻糖作為低溫保護(hù)劑，抑制PBS冷凍時(shí)的溶質(zhì)結(jié)晶，提升制劑穩(wěn)定性；

③ 針對(duì)氨基酸的選擇，凍干保護(hù)劑專利中用到的氨基酸有精氨酸/甘氨酸，精氨酸能夠抑制外泌體的聚集，防止發(fā)生破裂，甘氨酸可以起到賦形劑及降粘的作用；

但是具體的處方還是要根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較篩選。

MSC來源的外泌體或分泌物在多種慢性疾病中得到了治療效果的驗(yàn)證，包括關(guān)節(jié)炎、ARDS、心梗、克羅恩腸炎、神經(jīng)性疾病等。臨床轉(zhuǎn)化的難點(diǎn)，需要找到針對(duì)特定適應(yīng)癥的有效物質(zhì)、批次間產(chǎn)品質(zhì)量的均一性和穩(wěn)定性。

建議檢查下膠塞，可能是膠塞水分遷移到產(chǎn)品里了。剛下料，一周時(shí)候，分別測(cè)水分，就能確認(rèn)了。

這在結(jié)合具體的制備工藝、外泌體的純度、活性物質(zhì)的含量及體內(nèi)外活性、藥理試驗(yàn)來確定。

有相關(guān)研究顯示，N乙酰半胱氨酸對(duì)組織和細(xì)胞確實(shí)有保護(hù)作用，但是在上市產(chǎn)品中未見N乙酰半胱氨酸作為保護(hù)劑使用；

在上市產(chǎn)品中應(yīng)用較多的氨基酸保護(hù)劑是組氨酸、精氨酸和甲硫氨酸。

可以先通過外觀、水分含量、外泌體凍干前后顆粒濃度/粒徑的變化、外泌體形態(tài)等快速評(píng)價(jià)，再結(jié)合活性檢測(cè)結(jié)果做出初步判斷；通過前述的評(píng)價(jià)后，可以開展加速穩(wěn)定性試驗(yàn)評(píng)價(jià)凍干制劑的穩(wěn)定性，在此基礎(chǔ)上，進(jìn)行長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)。

Tris緩沖體系可以作為輔料應(yīng)用在注射劑中，在目前已上市的四款LNP藥物中，有3款均是用到Tris緩沖體系的，且其安全性已經(jīng)得到了驗(yàn)證，因此當(dāng)作為輔料使用時(shí)，符合藥典要求的注射級(jí)別Tris緩沖體系在注射劑中應(yīng)用無安全隱患；

氨丁三醇的衍生物使用時(shí)，會(huì)產(chǎn)生一定的毒性作用，但毒性作用的產(chǎn)生與使用劑量及注射部位和使用不當(dāng)相關(guān)，應(yīng)在醫(yī)生遵囑下合理用藥。

正常如果是容量法，可以用其他試劑先溶解預(yù)處理再進(jìn)行滴定，這個(gè)可以找水分儀廠家給具體方案，目前我們實(shí)驗(yàn)室用的是庫(kù)倫法，也可以避免這個(gè)問題。