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本文文章來源:輔必成(上海)醫(yī)藥科技有限公司 作者:限掌
在乳劑的分析檢測中,經(jīng)常會用到蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD),其zui大的優(yōu)越性在于能檢測不含發(fā)色團的化合物,如:碳水化合物、磷脂、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性劑、藥物等。因為ELSD的響應不依賴于樣品的光學特性,任何揮發(fā)性低于流動相的樣品均能被檢測,不受其官能團的影響,他的多用途與高性能與RID(示差折光檢測器)相比,優(yōu)勢如下:
檢測器類型
ELSD
RID
原理
光散射
折射率
靈敏度
高
低
環(huán)境溫度影響
不敏感
敏感
梯度洗脫
可以
不可以
溶劑峰干擾
受溶劑峰干擾
溶劑無響應,無溶劑峰

重點來了,每個儀器都有自身的優(yōu)缺點,ELSD也不例外。在ELSD的使用的過程中,遇到過一些五花八門的問題。羅列如下:
1.改變漂移管溫度后儀器的響應不一樣
溫度太低,基線水平較高,流動相得不到充分揮發(fā);溫度太高,會使流動相沸騰,反而增加背景噪聲,同時還有可能導致被測樣品的部分揮發(fā),降低信噪比。zui優(yōu)的溫度應為流動相基本揮發(fā)基礎上,產(chǎn)生可接受噪音的zui低溫度。
2.改變載氣流速后儀器的響應不一樣
其它條件不變的情況下,載氣流速越小,形成的物質(zhì)粒子半徑越大,對激光的散射能力越強,相應的響應信號越大,zui優(yōu)的載氣流速應為可接受噪音基礎上并且產(chǎn)生較高響應的zui低流速。
3.儀器一直顯示未就緒狀態(tài)
不同溶劑的揮發(fā)性不同,儀器較長時間保存在易揮發(fā)的溶劑中,由于溶劑的揮發(fā)而導致液相的脫氣機真空不夠而儀器一直顯示未就緒狀態(tài)。遇到這種情況后要先更換揮發(fā)性較低的溶劑(如異丙醇)對儀器的每個管路分別Purge 10分鐘以上,然后儀器的噪音會逐漸降低,軟件也會由未就緒變成空閑狀態(tài)。然后就可以更換需要的流動相進行平衡。
4.儀器的基線很亂,無規(guī)律狀態(tài),噪聲范圍很大
這種情況多半是漂移管污染了,需要對漂移管進行清洗。按照儀器說明書的操作用適合的工具拆開儀器,用專用的清理刷使用乙醇和清水進行清洗。
5.序列太長時,同一樣品在序列前后的峰面積差異較大
遇到這種情況就要考慮同一序列中需要排的樣品數(shù)了。分析原因,可能是流動相組成中不同成分的揮發(fā)性不一致,導致運行到后面的流動相中不同組分的比例發(fā)生變化,出峰情況也就不一樣了;還有可能在運行的過程中樣品顆粒有少量殘留在儀器中沒有排出而導致后面的樣品面積增大。使用ELSD檢測時,可減少同一序列的樣品數(shù)量,檢測的數(shù)量少了,相對儀器的負擔也會減少,維護起來也方便。
使用中注意事項:
1.流動相的揮發(fā)性一定要低于被測樣品,這樣才不會有溶劑的干擾。
2.ELSD使用前要先通氣,再升溫,zui后再進流動相,使用后要先停流動相,再降溫,zui后停氣。
3.可以選擇高溫(110℃),通氣(流速根據(jù)使用人的情況來定)的條件進行清洗系統(tǒng),沖洗的流動相可以選擇水、甲醇或異丙醇。
